Tecniche e Metodologie | | Stampa | |
TECNOLOGIE UTILIZZATE - Misurazione delle caratteristiche cinetiche, distribuzione e quantizzazione dei recettori per neurotrasmettitori mediante l'utilizzo di ligandi marcati su preparazioni di membrane (binding) o fettine di cervello di ratto (autoradiografia). - Misurazione in vitro della funzionalità di recettori per neurotrasmettitori associati a canali ionici permenali agli ioni cloro e calcio. - Purificazione, separazione e misurazione di steroidi mediante tecniche cromatografiche e radioimmunologiche. - Microdialisi cerebrale in ratti e topi svegli e liberi di muoversi. - Misurazione dei livelli cerebrali di neurotrasmettitori mediante HPLC. - Preparazione di colture primarie neuronali e gliali. - Separazione e misurazione di proteine utilizzando anticorpi specifici tra-mite tecniche di Western Blot. - Studio dell'espressione proteica su tessuto o cellule in coltura utilizzando anticorpi specifici tramite tecnioche di immunoistochimica o immunocitochimica. - Isolamento purificazione e misurazione di acidi nucleici (DNA e mRNA) mediante reazioni di polimerizzazione a catena (PCR e RT-PCR) e saggi di protezione dell'RNA da RNAsi (RPA). - Clonazione di DNA codificante proteine recettoriali, enzimatiche e neuro-trasmettitoriali. - Espressione di recettori clonati negli oociti di Xenopus leavis come modello per studiare l'attività dei recettori utilizzando la tecnica del Voltage-clamp a due elettrodi.- Patch clamp. Registrazione elettrofisiologica con la tecnica del patch clamp su neuroni in coltura ed in fettina di tessuto. - Modelli comportamentali e farmacologici in animali da laboratorio (ratto e topo) per la valutazione dell'attività anticonvulsivante, ansiolitica, anal-gesica e sedativo-ipnotica dei farmaci. - Modelli molecolari, neurochimici, comportamentali e farmacologici perla valutazione della tolleranza e dipendenza dai farmaci. |